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Exosomes(外泌體)作為一種小囊泡體結構,廣泛分布于外周血、尿液、唾液、腹水和羊水等多種體液中,任何組織或細胞都可以分泌外泌體,由不同細胞分泌的外泌體攜帶不同的組分,一般包括DNA、RNA、蛋白質和脂類等,這些組分賦予外泌體多種多樣的生物學功能,例如作為潛在的疾病治療靶點、早期診斷標記物和靶向藥物載體等,已成為近年來生命科學及醫學領域的重要研究熱點。

外泌體生物學功能研究的關鍵前提是提取出高質量的外泌體,傳統提取方法利用超速離心或密度梯度離心對外泌體進行富集,這些方法耗時耗力,提取效果或產量卻并不一定理想。

今天,小編給大家推薦一種新型Exosomes提取工具–Ribo? Exosome Isolation Reagent,該試劑盒僅需通過簡單混勻和常規離心,即可從細胞上清、血清血漿或其他體液中獲取大量結構和功能完整的Exosome,更加便捷、高效、高純度。提取產物可用于NGS、細胞共培養、疾病分析、基因表達、信號轉導和互作、體內注射等后續功能實驗。

 

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Ribo? Exosome Isolation Reagent

? 銳博生物自主專利產品–【一種分離外泌體的方法及其試劑盒 ? 專利申請號:CA201510469340.3】

? 客戶文章1600+篇

 

產品特點:

? 操作便捷:實驗步驟簡單,1小時快速抽提

? 兼容性強:廣泛適用于細胞上清、血清/血漿或其他體液(尿液、腦脊液、唾液、乳汁、肺泡灌洗液等)外泌體抽提

? 高效富集:樣本少(血清2~4ml,細胞上清或其他體液20ml),外泌體得率高

? 結果可靠:抽提效果精準可靠,外泌體純度高

 

結果示例:

HeLa 細胞上清經Ribo?Exosome Isolation Reagent 抽提,用攜帶熒光基團的CD63 和CD81 抗體分別與抽提前樣本及抽提產物進行免疫反應,使用流式細胞儀檢測熒光強度。

 

結果表明,抽提前兩個標志物抗體熒光強度均處于背景閾值范圍內,抽提后熒光強度明顯提升,呈現陽性結果,表明exosomes 被富集出來。

 

客戶案例:

 

應用案例一:細胞培養基、血漿樣本Exosome抽提

Cell Death & Disease丨Long noncoding RNA UCA1 from hypoxia-conditioned hMSC-derived exosomes: a novel molecular target for cardioprotection through miR-873-5p/XIAP axis

 

間充質干細胞(hMSCs)分泌的外泌體(Exo)對心肌損傷具有保護作用。為了探索外泌體在心肌梗死(MI)后促進心肌細胞存活和功能的作用與機制。本研究首先在缺氧和常氧條件下培養hMSCs。然后在體外使用RiboTM Exosome Isolation Reagent(for cell culture media, C10130-2, Ribobio, China)分離缺氧條件下hMSC源性外泌體(Hypo-Exo)和常氧條件下hMSC源性外泌體(Nor-Exo);同時收集人類血漿樣本,通過RiboTM Exosome Isolation Reagent (a precipitation reagent for plasma or serum, C10110-2, Ribobio, China)分離缺氧和常氧條件下hMSC源性外泌體,并對這些外泌體進行表征。

 

Sun L, et al. Cell death & disease, 2020, 11(8): 1-16.

結果顯示:

1、 分離出的Exo表現出典型的脂質雙層膜包裹的納米顆粒(圖D);

2、 TSG101、CD81、CD63蛋白在常氧和缺氧Exo中均陽性表達(圖E);

3、 NTA顯示常氧和缺氧Exo的峰值直徑分別為96.7nm和97.9nm(圖F)。

 

應用案例二:血清樣本Exosome抽提

Molecular Therapy丨miR-135b Delivered by Gastric Tumor Exosomes Inhibits FOXO1 Expression in Endothelial Cells and Promotes Angiogenesis

 

胃癌(GC)強大的血管生成是其迅猛發展的原因之一。藥物和其他治療方法并不能很好地解決GC中血管生成的問題。外泌體遞送的miRNA可以極大地促進GC中的血管生成。本研究使用Exosome Isolation Reagent for plasma or serum (RiBobio, C10110-2, Guangzhou, China)分離人類血清和小鼠血漿中的外泌體。發現miR-135b通過外泌體被遞送至腫瘤細胞,以發揮其對GC中血管生成的作用。研究結果闡明了一個由外泌體、miRNAs和靶基因組成的新信號通路,為抗血管生成治療提供了潛在的靶點。

 

Bai M, et al. Molecular Therapy, 2019, 27(10): 1772-1783.

結果顯示:

1、 TEM檢測顯示人類血清分離的外泌體近似為球形(圖A);

2、 Western blot檢測到外泌體蛋白標志物TSG101、Alix和CD63的表達(圖B);

3、 TEM觀察到從小鼠血漿中分離出的外泌體(圖E)。

 

應用案例三:尿液樣本Exosome抽提

Europe PMC預印本和同行評審文章丨Up-Regulation of Urinary Exosomal Hsa-microRNA-200b-3p and Hsa-microRNA-206 in Patients of Steroid-induced Osteonecrosis of Femoral Head

 

尿液外泌體miRNAs在各種疾病的發生和發展中起著至關重要的作用。為了確定尿液外泌體中的miRNAs在激素性股骨頭壞死(SONFH)診斷中的價值,本研究搜集了30名SONFH患者、10名髖骨關節炎(HOA)患者和10名健康對照者的尿液樣本,然后使用RiboTM Exosome Isolation Reagent分離尿液樣本中的外泌體,并對其進行表征。發現SONFH患者尿液外泌體中的Hsa-microRNA-200b-3p和Hsa-microRNA-206表達上調,可作為SONFH的非侵入性生物標志物。

 

Chen D, et al. 2020.

結果顯示:

1、 TEM檢測顯示尿液外泌體的直徑范圍為50-100nm(圖A);

2、 NTA顯示外泌體的大小在100-150nm內分布很豐富(圖B);

3、 外泌體表面蛋白流式細胞術分析顯示CD63和CD81高表達,分別為96.9%和98.8%(圖C)。

 

應用案例四:腦脊液樣本Microvesicles/Exosome抽提

Molecular Medicine Reports丨Quantitative proteomic characterization of microvesicles/exosomes from the cerebrospinal fluid of patients with acute bilirubin encephalopathy

 

在中樞神經系統發育的關鍵時期,嚴重的高膽紅素血癥可引起神經毒性,并可能導致急性膽紅素腦?。ˋBE)。本研究使用Ribo? exosome isolation reagent (cat. no. C10120; Guangzhou Ribobio Co., Ltd.)從ABE患者和年齡匹配對照組的腦脊液(CSF)中分離出微泡/外泌體(MV/E),以鑒定腦脊液MV/E中的差異表達蛋白(DEPs)。這將有助于加深對ABE發病機制的理解,并有助于發現早期診斷的生物標志物和治療靶點。

 

Tan N, et al. Molecular Medicine Reports, 2020.

結果顯示:

NTA分析顯示ABE患者和對照組的MV/E顆粒大小的直徑范圍為75-200nm,并且ABE患者和對照組的MV/E顆粒的峰值濃度為103nm。此外,三條曲線重疊,表明三組樣品是均勻的、且雜質少,說明成功地從腦脊液中分離出了MV/E。

 

 

代表性客戶文章:

[1] Sun L, Zhu W, Zhao P, et al. Long noncoding RNA UCA1 from hypoxia-conditioned hMSC-derived exosomes: a novel molecular target for cardioprotection through miR-873-5p/XIAP axis[J]. Cell death & disease, 2020, 11(8): 1-16.

[2] Zhang K, Dong C, Chen M, et al. Extracellular vesicle-mediated delivery of miR-101 inhibits lung metastasis in osteosarcoma[J]. Theranostics, 2020, 10(1): 411.

[3] Liu X, Li X, Zhu W, et al. Exosomes from mesenchymal stem cells overexpressing MIF enhance myocardial repair[J]. Journal of Cellular Physiology, 2020.

[4] Bai M, Li J, Yang H, et al. MiR-135b delivered by gastric tumor exosomes inhibits FOXO1 expression in endothelial cells and promotes angiogenesis[J]. Molecular Therapy, 2019.

[5] Xu W, Wu Y, Hu Z, et al. Exosomes from Microglia Attenuate Photoreceptor Injury and Neovascularization in an Animal Model of Retinopathy of Prematurity[J]. Molecular Therapy-Nucleic Acids, 2019, 16: 778-790.

 

產品訂購:

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產品編碼 產品名稱 目錄價
C10130-1 Exosome Isolation Reagent (for cell culture media ), 15mL ¥1,800.00
C10130-2 Exosome Isolation Reagent (for cell culture media ), 60mL ¥5,900.00
C10120-1 Exosome Isolation Reagent (for other body fluids ) , 15mL ¥1,800.00
C10120-2 Exosome Isolation Reagent (for other body fluids ), 60mL ¥5,900.00
C10110-2 Exosome Isolation Reagent (for plasma or serum ), 10mL ¥2,990.00
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