In vivo siRNA最關鍵的問題就是siRNA穩定性及給藥策略，適當的化學修飾是解決siRNA穩定的重要方法之一。銳博生物研發的genOFFTM?in vivo siRNA，采用特殊的化學修飾方式，大大提高了siRNA的血清穩定性，并保持了siRNA的高效活性；通過采用國際先進的處理方法，能夠最大限度降低對實驗動物的毒性。
In vivo siRNA給藥方法大致分為系統給藥（如靜脈給藥、腹腔給藥等）和局部給藥（如皮下注射，玻璃體給藥，鞘內給藥等）。siRNA系統給藥每次注射5~20nmol/20g體重，局部給藥則需每次注射1~5nmol/20g體重, 給藥頻率往往是一周2~3次，也可根據實驗方案靈活設定給藥劑量和頻次，探索更佳的實驗條件。
首先需要根據動物模型和實驗方案，確定給藥量和給藥次數，然后計算出實驗所需的總用量。需要根據不同的器官來選擇給藥方法，而給藥量因不同給藥方法和實驗目的而異。如肝臟、腎臟、肌肉等常用靜脈注射（系統給藥）；而皮下腫瘤則常用到瘤內注射（局部給藥）。
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局部給藥（Local administration）
適用范圍：淺表器官和組織，包括眼、肺、腦、肌肉、皮下組織、葉鞘組織等。
特點：最直接最常用的導入方式，siRNA 的導入效率較高，用量少，siRNA 能很快被吸收。因此，genOFFTM?in vivo siRNA 在局部注射的應用中更有優勢。
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系統給藥（Systemic administration）
適用范圍：siRNA 具有廣泛的組織分布，包括心、肝、腎、肺等。
特點：一些無法通過局部給藥方式到達的靶位，如深入的內臟器官和一些散在分布的靶位（如淋巴細胞，轉移性腫瘤細胞等），一般使用系統注射方式。
小編之前已經給大家整理一些關于動物用siRNA產品的客戶應用案例，詳情請見：
動物用siRNA案例應用策略解析(20210609)丨含動物造模、實驗處理、給藥方式、給藥劑量……
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本期文章小編給大家更新了幾篇關于in vivo siRNA給藥方式的客戶應用案例，希望能夠對正在或即將要做動物實驗的各位小伙伴有一定的幫助！
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應用案例1：
Cell Death & Differentiation（IF15.822）丨LncRNA NEAT1 controls the lineage fates of BMSCs during skeletal aging by
impairing mitochondrial function and pluripotency maintenance
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研究模型：老年性骨質疏松癥（選擇18個月大的老齡小鼠作為動物研究模型）
動物模型：18月齡C57BL/6小鼠（隨機分為3組，分別注射si-NC、si-Neat1、PBS）
給藥方式：尾靜脈注射
給藥劑量：100nM
給藥頻率：每周注射1次，注射6周
Fig1. si-Neat1遞送可防止老年小鼠的骨質流失和骨髓脂肪堆積
參考文獻：Zhang H, Xu R, Li B, et al. LncRNA NEAT1 controls the lineage fates of BMSCs during skeletal aging by impairing mitochondrial function and pluripotency maintenance[J].?Cell Death & Differentiation, 2021: 1-15.
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應用案例2：
Molecular Therapy（IF11.454）丨Long noncoding RNA lnc-POP1-1 upregulated by VN1R5 promotes cisplatin resistance in head
and neck squamous cell carcinoma through interaction with MCM5
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研究模型：頭頸部鱗狀細胞癌（將1×107?HNSCC腫瘤細胞皮下注射到小鼠右側，構建異種移植小鼠模型，小鼠在腫瘤接種后第6、9、12、15和18天腹腔注射5mg/kg順鉑，當腫瘤大小長到5mm×5mm，瘤內注射siRNA或ASO）
動物模型：腫瘤異種移植小鼠模型（分為4組，分別注射si-NC、si-MCM5、si-MCM5+ASO-NC、si-MCM5+ASO-lnc-POP1-1）
給藥方式：瘤內注射
給藥劑量：10nmol
給藥頻率：每3天注射1次，注射5次
Fig2. 注射si-MCM5或ASO-lnc-POP1-1與si-MCM5可導致小鼠的腫瘤體積和重量顯著下降
參考文獻：Jiang Y, Guo H, Tong T, et al. Long noncoding RNA lnc-POP1-1 upregulated by VN1R5 promotes cisplatin resistance in head and neck squamous cell carcinoma through interaction with MCM5[J].?Molecular Therapy, 2021.
應用案例3：
Molecular Therapy-Nucleic Acids（IF8.886）丨circRNA-DURSA regulates trophoblast apoptosis via miR-760-HIST1H2BE axis in
unexplained recurrent spontaneous abortion
研究模型：自然流產（選擇6-8周齡的ICR小鼠，即雌性小鼠與雄性小鼠交配，選擇雌性小鼠作為動物研究模型）
動物模型：體內妊娠ICR雌性小鼠模型（分為兩組，分別注射si-circRNA-DURSA和 NC）
給藥方式：子宮角腔注射
給藥劑量：10 nmol
給藥頻率：雌性小鼠在看到栓子后第4天注射
Fig3. 注射si-circRNA-DURSA到體內妊娠ICR小鼠中可抑制體內胚胎植入和胎盤形成
參考文獻：Tang M, Bai L, Wan Z, et al. circRNA-DURSA regulates trophoblast apoptosis via miR-760-HIST1H2BE axis in unexplained recurrent spontaneous abortion[J].?Molecular Therapy-Nucleic Acids, 2021.
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應用案例4：
Cell Death & Disease（IF8.462）丨SESN2 protects against denervated muscle atrophy through unfolded protein response and
mitophagy
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研究模型：肌萎縮（選擇10周齡雄性C57BL/6 J小鼠，對小鼠右后腿進行去神經手術，構建去神經雄性C57BL/6 J小鼠模型，用于制備PERK和C/EBPβ敲低小鼠模型）
動物模型：去神經雄性C57BL/6 J小鼠模型（分為兩組，分別注射PERK和C/EBPβ siRNA、NC對照）
給藥方式：腓腸肌注射
給藥劑量：10 nmol
給藥頻率：每3天注射1次
Fig4. 注射PERK和C/EBPβ siRNA以構建PERK和C/EBPβ敲低模型，在去神經GAS中進一步驗證了PERK-C/EBPβ軸對SESN2表達的影響
參考文獻：Yang X, Xue P, Yuan M, et al. SESN2 protects against denervated muscle atrophy through unfolded protein response and mitophagy[J].?Cell death & disease, 2021, 12(9): 1-13.
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應用案例5：
Cell Death & Disease（IF8.462）丨Sulfiredoxin-1 attenuates injury and inflammation in acute pancreatitis through the ROS/ER
stress/Cathepsin B axis
研究模型：急性胰腺炎（購買C57BL/6J小鼠，安置在無病原體的環境中，小鼠經尾靜脈注射Srxn1 siRNA或NC對照，最后一次siRNA注射后2天注射雨蛙素以誘導急性胰腺炎AP模型）
動物模型：C57BL/6J小鼠模型（分為兩組，分別注射Srxn1 siRNA、NC對照）
給藥方式：尾靜脈注射
給藥劑量：20 nmol
給藥頻率：每周2次，共4周
Fig5. 注射Srxn1 siRNA加重了雨蛙素誘導的急性胰腺炎
參考文獻：He J, Ma M, Li D, et al. Sulfiredoxin-1 attenuates injury and inflammation in acute pancreatitis through the ROS/ER stress/Cathepsin B axis[J].?Cell Death & Disease, 2021, 12(7): 1-11.
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應用案例6：
Cell Death & Disease（IF8.462）丨Leukemia inhibitory factor regulates Schwann cell proliferation and migration and
affects peripheral nerve regeneration
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研究模型：神經損傷（成年SD大鼠在麻醉后進行坐骨神經擠壓損傷以構建坐骨神經擠壓損傷SD大鼠模型）
動物模型：坐骨神經擠壓損傷SD大鼠模型（分為兩組，分別注射LIF-siRNA [siRNA-1]、NC對照）
給藥方式：神經損傷部位（左后爪）注射
給藥劑量：5ul
給藥頻率：神經擠壓傷后1周、2周和3周注射
Fig6. 注射LIF-siRNA可刺激神經功能恢復
參考文獻：Chen Q, Liu Q, Zhang Y, et al. Leukemia inhibitory factor regulates Schwann cell proliferation and migration and affects peripheral nerve regeneration[J].?Cell death & disease, 2021, 12(5): 1-14.
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應用案例7：
Oxidative Medicine and Cellular Longevity（IF6.543）丨Hydromorphone Protects against CO 2 Pneumoperitoneum-Induced
Lung Injury via Heme Oxygenase-1-Regulated Mitochondrial Dynamics
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研究模型：肺損傷（小鼠稱重并通過腹腔內注射劑量為40mg/kg的1%戊巴比妥鈉進行麻醉。麻醉穩定后，將Microrenathane導管插入每只小鼠的股動脈。然后，將動脈導管連接到傳感器以監測股動脈平均動脈壓。根據預實驗結果，在氣腹建立前15分鐘，通過腹腔注射將總共120μg（10μl）氫嗎啡酮（HR組）或0.9% NS（10μl）（P組）緩慢注射到小鼠體內。然后，通過將Veress針插入腹腔，并通過Wisap CO2氣體吹入器吹入CO2，建立氣腹。使用吹入器將腹內壓設置為15 mmHg進行吹氣（1 h）和CO2放氣（3 h）。小鼠吸入CO2后出現中度腹脹，表明模型建立。對照組（C組）未建立氣腹）
動物模型：氣腹誘導的肺損傷C57BL/6小鼠模型（分為兩組，分別注射HO-1-siRNA、NC對照）
給藥方式：尾靜脈注射
給藥劑量：/
給藥頻率：實驗干預前48h注射
Fig7. 注射HO1-siRNA的小鼠中，氫嗎啡酮對氣腹誘導的肺損傷的保護作用消失
參考文獻：Shi J, Du S H, Yu J B, et al. Hydromorphone Protects against CO2 Pneumoperitoneum-Induced Lung Injury via Heme Oxygenase-1-Regulated Mitochondrial Dynamics[J].?Oxidative medicine and cellular longevity, 2021, 2021.
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更多動物用siRNA應用案例持續更新中，敬請期待……
