反義寡核苷酸（ASOs）是一種短的、化學合成的單鏈寡核苷酸，通過對其骨架和糖基進行修飾，可增加其穩定性、藥理特性以及與靶標的結合，并通常具有較小的毒性。常用于細胞和動物體內基因功能研究以及ASO核酸藥物的開發等。
經過化學修飾的ASOs可以通過多種作用機制發揮作用。常見的一種作用方式是與RNA結合，形成RNA&DNA雜合體，依賴于RNase H發揮作用，從而導致靶標mRNA的降解，主要適用于干擾細胞核內的lncRNA/circRNA/mRNA等。
（圖片來源于：Vickers and Crooke, 2015）
銳博生物采用國際一流的寡核苷酸合成和修飾技術，可針對lncRNA/circRNA/mRNA不同序列設計高特異性ASO序列，所合成的ASO序列是經過特殊化學修飾的單鏈RNA&DNA雜合體，極大地提高了其在細胞及動物體內的穩定性，可同時干擾胞質和核內的靶標RNA，亦可用于體內實驗。并且相對病毒載體，合成周期短，適于后續ASO核酸藥的研發。
動物用ASO體內給藥方法大致亦可分為系統給藥和局部給藥，系統給藥一般為5-20nmol，局部給藥為1-10nmol，也可根據實驗方案靈活設定給藥劑量和頻次，探索更佳的實驗條件。
小編之前已經給大家整理一些關于動物用siRNA產品的客戶應用案例，詳情請見：動物用ASO案例應用策略解析(20210616)丨含動物造模、實驗處理、給藥方式、給藥劑量……
本期文章小編給大家更新了幾篇關于動物用ASO給藥方式的客戶應用案例，希望能夠對正在或即將要做動物實驗的各位小伙伴有一定的幫助！
應用案例1：
Molecular Cancer（IF27.401）丨Circular RNA circIKBKB promotes breast cancer bone metastasis through sustaining
NF-κB/bone remodeling factors signaling
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研究模型：乳腺癌骨轉移（將骨轉移SCP2細胞注射到小鼠體內，以構建乳腺癌骨轉移異種移植疾病模型）
動物模型：骨轉移SCP2細胞異種移植小鼠模型（分成3組，circIKBKB-ASO#1組、circIKBKB-ASO#2組、ASO-ctrl組）
給藥方式：尾靜脈注射
給藥劑量：10 nmol
給藥頻率：每周兩次
Fig1. 將circIKBKB-ASO注射到乳腺癌骨轉移小鼠模型中可抑制BC-BM
參考文獻：Xu Y, Zhang S, Liao X, et al. Circular RNA circIKBKB promotes breast cancer bone metastasis through sustaining NF-κB/bone remodeling factors signaling[J].?Molecular cancer, 2021, 20(1): 1-18.
應用案例2：
Nature Communications（IF14.913）丨LINC00842 inactivates transcription co-regulator PGC-1α to promote pancreatic
cancer malignancy through metabolic remodelling
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研究模型：胰腺癌（將PDAC細胞原位植入小鼠體內，以構建異種移植小鼠模型）
動物模型：PDAC細胞異種移植小鼠模型（分為4組[n=5]，a、注射ASO-Ctrl；b、注射奧利司他；c、注射ASO-LINC00842；d、注射ASO-LINC00842和奧利司他）
給藥方式：靜脈注射
給藥劑量：75?mg/kg
給藥頻率：前三天每天1次，然后1周1次
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Fig2. 用ASO-LINC00842 或奧利司他治療患有原位植入腫瘤的小鼠，顯著降低了腫瘤負荷并延長了存活時間，并且聯合治療比單獨使用具有更好的益處
參考文獻：Huang X, Pan L, Zuo Z, et al. LINC00842 inactivates transcription co-regulator PGC-1α to promote pancreatic cancer malignancy through metabolic remodelling[J].?Nature Communications, 2021, 12(1): 1-16.
應用案例3：
The Journal of Clinical Investigation（IF14.801）丨Circular RNA cia-MAF drives self-renewal and metastasis of liver
tumor-initiating cells via transcription factor MAFF
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研究模型：肝癌（將肝癌患者來源的異種移植物植入到小鼠體內，以構建患者來源的異種移植小鼠模型）
動物模型：患者來源的異種移植小鼠模型（分為2組，MAFF ASO組、Vehicle組）
給藥方式：瘤內注射
給藥劑量：5nmol
給藥頻率：每3天注射1次
Fig3. 注射MAFF ASO阻斷了腫瘤的增殖，延長了存活時間，削弱了TIC的維持，并降低了響應細胞中的CD44表達
參考文獻：Chen Z, Lu T, Huang L, et al. circular RNA cia-MAF drives self-renewal and metastasis of liver tumor-initiating cells via transcription factor MAFF[J].?The Journal of Clinical Investigation, 2021.
應用案例4：
Molecular Therapy（IF11.454）丨lncRNA ITGB8-AS1 functions as a ceRNA to promote colorectal cancer growth and
migration through integrin-mediated focal adhesion signaling
研究模型：結直腸癌（BALB/c裸鼠皮下植入HCT116細胞和CRC PDX，以構建結直腸癌異種移植小鼠模型）
動物模型：HCT116異種移植和CRC PDX小鼠模型（分為2組：NC-ASO組、ITGB8-AS1-ASO組）
給藥方式：瘤內注射
給藥劑量：10nM
給藥頻率：每3天注射1次，連續21天
Fig4. 將ITGB8-AS1-ASO注射到HCT116衍生的異種移植和CRC PDX模型小鼠中可引發抗腫瘤功效
參考文獻：Lin X, Zhuang S, Chen X, et al. LncRNA ITGB8-AS1 functions as a ceRNA to promote colorectal cancer growth and migration through integrin-mediated focal adhesion signaling[J].?Molecular Therapy, 2021.
應用案例5：
Molecular Therapy（IF11.454）丨Long noncoding RNA lnc-POP1-1 upregulated by VN1R5 promotes cisplatin resistance in head
and neck squamous cell carcinoma through interaction with MCM5
研究模型：頭頸部鱗狀細胞癌（將1×107?HNSCC腫瘤細胞皮下注射到小鼠右側，構建異種移植小鼠模型，小鼠在腫瘤接種后第6、9、12、15和18天腹腔注射5mg/kg順鉑，當腫瘤大小長到5mm×5mm，瘤內注射siRNA或ASO）
動物模型：裸鼠異種移植瘤模型（分為4組，分別注射si-NC、si-MCM5、si-MCM5+ASO-NC、si-MCM5+ASO-lnc-POP1-1）
給藥方式：瘤內注射
給藥劑量：10nmol
給藥頻率：每3天注射1次，注射5次
Fig5. 注射ASO-lnc-POP1-1與si-MCM5可導致小鼠的腫瘤體積和重量顯著下降
參考文獻：Jiang Y, Guo H, Tong T, et al. Long noncoding RNA lnc-POP1-1 upregulated by VN1R5 promotes cisplatin resistance in head and neck squamous cell carcinoma through interaction with MCM5[J].?Molecular Therapy, 2021.
應用案例6：
Journal of Hazardous Materials（IF10.581）丨lncRNA TUG1 as a ceRNA promotes PM exposure-induced airway hyper-reactivity
研究模型：PM暴露誘導的肺損傷/氣道高反應（將30只雄性野生型C57BL/6小鼠隨機分為6組[n=5]，并暴露于PM環境中）
動物模型：雄性野生型C57BL/6小鼠（分為6組，FRA（過濾室內空氣）暴露+ASO-mmu-NC (50nmol/kg)、FRA暴露+ASO-mmu-Tug1 (50nmol/kg)、低PM劑量 (300μg/m3) 暴露+ASO-mmu-NC (50nmol/kg)、低PM劑量 (300μg/m3) 暴露+ASO-mmu-Tug1 (50nmol/kg)、高PM劑量 (600μg/m3) 暴露+ASO-mmu-NC (50nmol/kg)、高PM劑量 (600μg/m3) 暴露+ASO-mmu-Tug1 (50nmol/kg)）
給藥方式：全身動態吸入/鼻腔給藥
給藥劑量：50nmol/kg
給藥頻率：第一階段每天暴露2小時，連續30天；第二階段每2天處理一次，連續10天
Fig6. 注射ASO-mmu-Tug1挽救了小鼠PM暴露誘導的AHR
參考文獻：Li B, Huang N, Wei S, et al. lncRNA TUG1 as a ceRNA promotes PM exposure-induced airway hyper-reactivity[J].?Journal of Hazardous Materials, 2021, 416: 125878.
應用案例7：
Oncogene（IF9.863）丨Long non-coding RNA LEISA promotes progression of lung adenocarcinoma via enhancing interaction
between STAT3 and IL-6 promoter
研究模型：肺腺癌（將1×107?HCC827-LEISA細胞皮下注射到裸鼠中，以構建異種移植肺腺癌腫瘤模型）
動物模型：腫瘤異種移植裸鼠模型（分為2組：ASO-NC組、ASO-LEISA組）
給藥方式：瘤內注射
給藥劑量：5nmol
給藥頻率：每周2次，注射5周
Fig7. 瘤內注射ASO-LEISA可抑制LAD腫瘤生長
參考文獻：Wu S, Liu B, Zhang Y, et al. Long non-coding RNA LEISA promotes progression of lung adenocarcinoma via enhancing interaction between STAT3 and IL-6 promoter[J].?Oncogene, 2021, 40(19): 3449-3459.
更多動物用ASO應用案例持續更新中，敬請期待……
