反義寡核苷酸（ASOs）是一種短的、化學合成的單鏈寡核苷酸，通過對其骨架和糖基進行修飾，可增加其穩定性、藥理特性以及與靶標的結合，并通常具有較小的毒性。常用于細胞和動物體內基因功能研究以及ASO核酸藥物的開發等。
經過化學修飾的ASOs可以通過多種作用機制發揮作用。常見的一種作用方式是與RNA結合，形成RNA&DNA雜合體，依賴于RNase H發揮作用，從而導致靶標mRNA的降解，主要適用于干擾細胞核內的lncRNA/circRNA/mRNA等。
（圖片來源于：Vickers and Crooke, 2015）
銳博生物采用國際一流的寡核苷酸合成和修飾技術，可針對lncRNA/circRNA/mRNA不同序列設計高特異性ASO序列，所合成的ASO序列是經過特殊化學修飾的單鏈RNA&DNA雜合體，極大地提高了其在細胞及動物體內的穩定性，可同時干擾胞質和核內的靶標RNA，亦可用于體內實驗。并且相對病毒載體，合成周期短，適于后續ASO核酸藥的研發。
動物用ASO體內給藥方法大致亦可分為系統給藥和局部給藥，系統給藥一般為5-20nmol，局部給藥為1-10nmol，也可根據實驗方案靈活設定給藥劑量和頻次，探索更佳的實驗條件。
小編之前已經給大家整理一些關于動物用ASO產品的客戶應用案例，詳情請見：
1、動物用ASO案例應用策略解析(20210616)丨含動物造模、實驗處理、給藥方式、給藥劑量……
2、【更新】動物用ASO案例應用策略解析(20211022)丨含給藥方式、給藥劑量、動物造模、實驗處理……
本期文章小編給大家更新了幾篇關于動物用ASO給藥方式的客戶應用案例，希望能夠對正在或即將要做動物實驗的各位小伙伴有一定的幫助！
客戶應用案例1：
Molecular Cancer（IF27.401）丨Long non-coding RNA LINC00680 functions as a ceRNA to promote esophageal squamous cell carcinoma progression through the miR-423-5p/PAK6 axis
研究模型：食管鱗狀細胞癌（將KYSE510細胞 [3×105/ 100μl無菌PBS] 皮下注射于小鼠左側，以構建食管鱗狀細胞癌異種移植疾病模型，當腫瘤大小約為100mm3時，將小鼠隨機分為兩組，每組5只）
動物模型：ESCC異種移植裸鼠模型（分成2組，ASO NC組、ASO LINC00680組）
給藥方式：瘤內注射
給藥劑量：5 nmol
給藥頻率：每5天給藥一次，連續注射8次
Fig1. 將ASO LINC00680注射到裸鼠體內可顯著抑制ESCC腫瘤生長
參考文獻：Xue S, Zheng B, Cao S, et al. Long non-coding RNA LINC00680 functions as a ceRNA to promote esophageal squamous cell carcinoma progression through the miR-423-5p/PAK6 axis[J]. Molecular Cancer, 2022, 21(1): 1-18.
客戶應用案例2：
Molecular Cancer（IF27.401）丨Tumor-suppressive circRHOBTB3 is excreted out of cells via exosome to sustain colorectal cancer cell fitness
研究模型：結直腸癌（將7×105 HCT116細胞重懸于100μl PBS中，接種于裸鼠脾臟，以構建CRC異種移植小鼠模型）
動物模型：CRC細胞肝轉移異種移植小鼠模型（分為2組，ASO NC組、ASO-exo與ASO-cir聯合處理組）
給藥方式：尾靜脈注射
給藥劑量：20nmol（20nmol ASO NC、10 nmol ASO-exo+10 nmol ASO-cir）
給藥頻率：每3天注射一次，連續注射6次
Fig2. ASO在體內抑制CRC細胞生長和轉移
參考文獻：Chen C, Yu H, Han F, et al. Tumor-suppressive circRHOBTB3 is excreted out of cells via exosome to sustain colorectal cancer cell fitness[J]. Molecular Cancer, 2022, 21(1): 1-19.
客戶應用案例3：
Molecular Cancer（IF27.401）丨LncRNA PKMYT1AR promotes cancer stem cell maintenance in non-small cell lung cancer via activating Wnt signaling pathway
研究模型：非小細胞肺癌（將1.5×106 A549細胞皮下注射4-6周齡雄性裸鼠體內，以構建NSCLC細胞異種移植小鼠模型，當異種移植瘤體積達到50 mm3時，隨機分為指定組）
動物模型：NSCLC細胞異種移植小鼠模型（分為3組，ASO NC組、MYT1AR ASO #1組、MYT1AR ASO #2組）
給藥方式：腫瘤周圍注射
給藥劑量：5nM
給藥頻率：每周2次，共注射6次
Fig3. 注射PKMYT1AR ASO可抑制體內腫瘤生長
參考文獻：He Y, Jiang X, Duan L, et al. LncRNA PKMYT1AR promotes cancer stem cell maintenance in non-small cell lung cancer via activating Wnt signaling pathway[J]. Molecular cancer, 2021, 20(1): 1-21.
客戶應用案例4：
Cell Death & Differentiation（IF15.828）丨Non-coding small nucleolar RNA SNORD17 promotes the progression of hepatocellular carcinoma through a positive feedback loop upon p53 inactivation
研究模型：肝細胞癌（將1×106腫瘤細胞皮下注射到4周大的BALB/c雄性裸鼠側腹，以構建肝細胞癌異種移植小鼠模型；將攜帶HepG2-KO和HepG2-WT細胞的小鼠皮下腫瘤切成小塊（1mm3）。將小鼠麻醉后，在上腹部和腹膜上切開一個切口。用棉簽暴露肝右葉，然后用剪刀切開。將一塊腫瘤移植到裸鼠的肝臟中（每組6只）。腹壁封閉。構建原位異種移植腫瘤模型）
動物模型：皮下異種移植小鼠模型和原位異種移植腫瘤模型（分為2組：SNORD17 ASOs組、NC ASOs組）
給藥方式：瘤內注射或腹腔內注射
給藥劑量：10 mg/kg
給藥頻率：每天注射1次，連續5天，然后停藥1天，共18天
Fig4. 將SNORD17 ASO注射到小鼠體內可抑制肝細胞癌皮下和原位腫瘤的生長
參考文獻：Liang J, Li G, Liao J, et al. Non-coding small nucleolar RNA SNORD17 promotes the progression of hepatocellular carcinoma through a positive feedback loop upon p53 inactivation[J]. Cell Death & Differentiation, 2022: 1-16.
客戶應用案例5：
Oncogene（IF9.867）丨Targeting KDM4A-AS1 represses AR/AR-Vs deubiquitination and enhances enzalutamide response in CRPC
研究模型：去勢難治性前列腺癌（將5×106 C4-2-EnzR細胞皮下植入6周齡雄性裸鼠體內，在第7天口服灌胃恩雜魯胺，在第14天將小鼠分成兩組）
動物模型：裸鼠異種移植小鼠模型（分為2組，分別注射PBS溶液、ASO-KDM4A-AS1）
給藥方式：腹腔內注射
給藥劑量：10?mg/kg
給藥頻率：在第14天注射1次
Fig5. 恩雜魯胺條件下腹腔注射ASO-KDM4A-AS1可顯著減少腫瘤體積
參考文獻：Zhang B, Zhang M, Yang Y, et al. Targeting KDM4A-AS1 represses AR/AR-Vs deubiquitination and enhances enzalutamide response in CRPC[J]. Oncogene, 2022, 41(3): 387-399.
客戶應用案例6：
Cancer Letters（IF8.679）丨A feedforward circuit between KLF5 and lncRNA KPRT4 contributes to basal-like breast cancer
研究模型：乳腺癌（將重懸于Matrigel中的1×106 HCC1806細胞注射到乳腺脂肪墊中，以構建異種移植小鼠模型。當腫瘤達到約50 mm3時，將小鼠分為2組）
動物模型：原位異種移植小鼠模型（分為2組，ASO-NC和KPRT4 ASO）
給藥方式：瘤內注射
給藥劑量：5nmol
給藥頻率：每3天注射一次，共注射6次
Fig6. 將KPRT4 ASO注射到小鼠體內明顯抑制了腫瘤生長
參考文獻：Du G, Sun J, Li Z, et al. A feedforward circuit between KLF5 and lncRNA KPRT4 contributes to basal-like breast cancer[J]. Cancer Letters, 2022: 215618.
更多動物用ASO應用案例持續更新中，敬請期待……
