高內涵篩選檢測細胞增殖周期方法
實驗示例
篩選分子:針對人類重要疾病的siRNA文庫;
細胞模型:人宮頸癌細胞Hela;
檢測儀器:高內涵篩選系統;
檢測指標:細胞增殖、細胞周期。
實驗流程
細胞培養;細胞轉染;細胞染色;熒光掃描。
實驗結果
1) 從全孔圖分析siRNA加入后對細胞總數的影響
將掃獲得的數據根據細胞大小(Wide, Depth)及熒光強度(Total intensity)進行分群,可獲得不同細胞的分布圖及數據。從下圖可以看出,與NC相比,針對gene2的siRNA加入后顯著降低了細胞總數,顯示針對gene2的siRNA抑制Hela細胞的增殖。
2) 從數據的統計分析看siRNA加入后對細胞總數的影響
將細胞分析后獲得的數據進行統計分析,結果顯示,與對照NC相比,針對gene1、8、9、10的siRNA顯著促進了細胞增殖,而針對gene2、3、4、5、6、7的siRNA顯著抑制了細胞增殖,針對gene11的siRNA對細胞增殖無顯著影響。
3) 從數據的統計分析看siRNA加入后對細胞周期的影響
將細胞分析后獲得的數據進行統計分析,結果顯示,與對照NC相比,針對gene1、8、9、10、11的siRNA顯著增加了處于G1期細胞數,而針對gene2、3、4、5、6、7的siRNA顯著增加了處于G2/M期細胞。從gene1及gene2不同熒光強度的細胞分布頻度圖也可看出gene1 siRNA處理的細胞處于G1期的細胞明顯多于gene2;而G2/M期細胞明顯少于gene2 siRNA。
4) 細胞的3D圖片
實驗過程中還可以提供細胞的3D圖片,該圖片在細胞信號轉導研究過程中便于研究細胞的定位情況。
5) siRNA處理后的細胞Heatmap
Heatmap便于迅速尋找差異明顯的藥物分子,如下圖分別顯示了總細胞數及G1期細胞數的熱圖。

