MicrONTM?miRNA agomir是經過特殊化學修飾的miRNA激動劑,可直接注射于動物體內,用于模仿內源性miRNA。相比細胞用miRNA mimic,動物用miRNA agomir具有更高的穩定性和miRNA活性,更易通過細胞膜、細胞間隙而富集于靶細胞。在動物實驗中agomir通??梢酝ㄟ^系統或局部注射等方法進行給藥。關于科研實驗中的給藥方式一般沒有固定的模式,給藥方式應該根據具體的實驗靈活設計,在實際實驗過程中不斷調整調整和優化。
小編之前已經給大家整理一些關于動物用agomir產品的客戶應用案例,詳情請見:動物用agomir產品案例應用策略解析(20210623)丨含動物造模、實驗處理、給藥方式、給藥劑量……
本期文章小編給大家帶來的是關于動物用miRNA agomir給藥方式的客戶應用案例,希望能夠對正在或即將要做動物實驗的各位小伙伴有一定的幫助!
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銳博生物miRNA agomir
中文名:miRNA激動劑
功能:模仿內源性的miRNA
純化方式:in vivo(Standard in vivo)
穩定性:經特殊化學修飾,穩定性高
給藥方式:局部給藥(1-10 nmol);系統給藥(5-20 nmol)
作用方式:雙鏈RNA,作用鏈為正義鏈,通過模擬miRNA進入miRISC復合物來調節靶mRNA的表達而發揮作用
應用案例1:
Molecular Cancer(IF27.404)丨Hypoxia downregulated miR-4521 suppresses gastric carcinoma progression through
regulation of IGF2 and FOXM1
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疾病模型:胃癌(①將表達熒光素酶的SGC7901細胞腹腔注射到8周齡雌性裸鼠體內;②對于皮下注射,將1×106?SGC7901細胞皮下注射到裸鼠的下背部區域,以構建胃癌異種移植小鼠模型)
動物模型:胃癌異種移植小鼠模型(分為2組,miR-4521 agomir組、Agomir NC組)
給藥方式:①尾靜脈注射;②瘤內注射
給藥劑量:①20mg/kg;②200ug
給藥頻率:①每周2次,共3周;②每兩天1次,連續2周
Fig1.注射miR-4521 agomir可抑制胃癌進展
參考文獻:Xing S, Tian Z, Zheng W, et al. Hypoxia downregulated miR-4521 suppresses gastric carcinoma progression through regulation of IGF2 and FOXM1[J].?Molecular cancer, 2021, 20(1): 1-19.
應用案例2:
Molecular Therapy(IF11.454)丨Tumor-derived exosomal microRNA-106b-5p activates EMT-cancer cell and M2-subtype TAM
interaction to facilitate CRC metastasis
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疾病模型:結直腸癌(將30只4-6周齡雌性BALB/c裸鼠隨機分為5組。將氯膦酸鹽脂質體靜脈注射到每只小鼠體內以進行巨噬細胞消融。然后,將HCT116細胞(每只小鼠5×106個細胞)皮下注射到每只小鼠的右側區域。同時,通過尾靜脈將THP1誘導的巨噬細胞(每只小鼠106個細胞/50 mL)注射到小鼠體內,間隔注射3天。10天后,將PBS、Nor-Exos、EMT-Exos、miR-106b agomir或miR-agomir-NC直接注射到植入的腫瘤中)
動物模型:異種移植裸鼠模型(隨機分為5組,PBS組、Nor-Exos組、EMT-Exos組、miR-106b agomir組、miR-agomir-NC組)
給藥方式:瘤內注射
給藥劑量:/
給藥頻率:瘤內注射1次
Fig2. 注射miR-106b agomir可通過轉錄后抑制PDCD4表達誘導TAMs(腫瘤相關巨噬細胞)的M2極化
參考文獻:Yang C, Dou R, Wei C, et al. Tumor-derived exosomal microRNA-106b-5p activates EMT-cancer cell and M2-subtype TAM interaction to facilitate CRC metastasis[J].?Molecular Therapy, 2021, 29(6): 2088-2107.
應用案例3:
Journal of Experimental & Clinical Cancer Research(IF11.160)丨Circular RNA circ_001422 promotes the progression and metastasis
of osteosarcoma via the miR-195-5p/FGF2/PI3K/Akt axis
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疾病模型:骨肉瘤(①將懸浮于100μl PBS中的5×106個穩定143B細胞皮下注射至裸鼠右肢,建立皮下移植瘤模型;②將懸浮于200μl PBS中的2×106個143B細胞通過尾靜脈注射到裸鼠體內以模擬腫瘤轉移,建立肺轉移模型)
動物模型:①皮下異種移植模型;②肺轉移模型(分為4組,對照組、OE-circ_001422組、OE-circ_001422?+?miR-195-5p agomir(ago)組、OE-circ_001422?+?miR-195-5p agomir + OE-FGF2組)
給藥方式:①瘤內注射;②尾靜脈注射
給藥劑量:/
給藥頻率:每周2次,共2周
Fig3. 注射miR-195-5p agomir可消除circ_001422過表達的作用,并減緩OS細胞的生長和轉移
參考文獻:Yang B, Li L, Tong G, et al. Circular RNA circ_001422 Promotes Progression and Metastasis of Osteosarcoma via the miR-195-5p/FGF2/PI3K/Akt Axis[J].?Journal of Experimental & Clinical Cancer Research, 2021.
應用案例4:
Cell Death & Disease(IF8.462)丨MicroRNA-93/STAT3 signalling pathway mediates retinal microglial activation and protects retinal
ganglion cells in an acute ocular hypertension model
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疾病模型:青光眼/急性高眼壓(通過AOH技術將大鼠眼內壓由10 mmHg升高至75 mmHg左右,持續1小時,以誘導大鼠AOH損傷,構建AOH大鼠模型)
動物模型:急性高眼壓(AOH)大鼠模型(分為5組,對照組、AOH組、agomir NC+AOH (NC?+?AOH)組、miR-93 agomir+AOH [miR-93+AOH]組、S3I-201+AOH [S3I?+?AOH]組)
給藥方式:玻璃體注射
給藥劑量:2ml(0.5?nmol/μl)
給藥頻率:AOH誘導前6h注射1次
Fig4. 注射miR-93 agomir可通過調節小膠質細胞反應保護視網膜免受AOH的影響
參考文獻:Wang Y, Chen S, Wang J, et al. MicroRNA-93/STAT3 signalling pathway mediates retinal microglial activation and protects retinal ganglion cells in an acute ocular hypertension model[J].?Cell Death & Disease, 2021, 12(1): 1-12.
應用案例5:
Cell death & disease(IF8.462)丨Downregulation of microRNA-9-5p promotes synaptic remodeling in the chronic phase after
traumatic brain injury
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疾病模型:創傷性腦損傷(使用打擊器控制裝置構建CCI模型用于模擬大鼠中度創傷性腦損傷。所有大鼠均通過腹腔注射3mL/kg 10%水合氯醛和50μg/kg舒芬太尼進行麻醉,并在麻醉誘導后維持在36-37℃。沖擊參數設置為速度3.5m/s,深度2.5mm,停留時間200ms。在右側頂骨矢狀縫外側4.0mm和前囟尾端5.0mm處進行直徑4.0毫米的開顱手術。撞擊后,局部灌注凝血酶于創面止血。用骨蠟關閉骨窗,縫合傷口)
動物模型:CCI大鼠模型(分為3組,miRNA-9-5p agomir/antagomir全程治療組[雙注射組,DI組]、miRNA-9-5p agomir/antagomir慢性治療組[單次注射組,SI組]、Sham組)
給藥方式:側腦室注射
給藥劑量:5ul(0.1mM)
給藥頻率:全程治療組在CCI后15 min和14天注射2次;慢性治療組僅在CCI后14天注射1次
Fig5. 注射miRNA-9-5p agomir/antagomir會影響CCI術后神經預后
參考文獻:Wu J, Li H, He J, et al. Downregulation of microRNA-9-5p promotes synaptic remodeling in the chronic phase after traumatic brain injury[J].?Cell death & disease, 2021, 12(1): 1-14.
應用案例6:
Elife(IF8.140)丨circPTPN12/miR-21-5 p/?Np63α pathway contributes to human endometrial fibrosis
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疾病模型:子宮內膜纖維化(對8-10周齡BALB/c雌性小鼠子宮內膜進行機械損傷。即用異氟醚麻醉發情期小鼠,進行剖腹探查以暴露子宮,然后插入表面粗糙的針以損傷子宮內膜。假手術的小鼠只是進行剖腹手術以暴露子宮而沒有受傷。機械損傷后5天,子宮內注射AAV-circPTPN12或AAV對照。機械損傷和AAV-circPTPN12注射后通過子宮內注射agomir,以研究miR-21-5p的治療效果)
動物模型:子宮內膜機械損傷小鼠模型(分為agomir-21-5p組、agomir-NC組)
給藥方式:子宮內注射
給藥劑量:5nmol
給藥頻率:每5天1次,共3次
Fig6. 子宮內注射agomir-21-5p可在體內減輕circPTPN12誘導的EEC-EMT
參考文獻:Song M, Zhao G, Sun H, et al. circPTPN12/miR-21–5 p/? Np63α pathway contributes to human endometrial fibrosis[J].?Elife, 2021, 10: e65735.
應用案例7:
JCI insight(IF8.314)丨The miR-182-5p/FGF21/acetylcholine axis mediates the crosstalk between adipocytes and macrophages
to promote beige fat thermogenesis
疾病模型:肥胖、代謝性疾?。ㄊ褂?周齡雄性小鼠通過脂肪墊注射技術建立miR-182-5p過表達小鼠模型)
動物模型:8周齡雄性小鼠(實驗組:注射miR-182-5p agomir;對照組:注射agomir NC)
給藥方式:脂肪墊注射
給藥劑量:2.5 nmol
給藥頻率:每3天重復注射一次,注射8次
Fig7. 注射miR-182-5p agomir到小鼠皮下脂肪墊中可抵抗肥胖及其代謝后果
參考文獻:Meng W, Xiao T, Liang X, et al. The miR-182-5p/FGF21/acetylcholine axis mediates the crosstalk between adipocytes and macrophages to promote beige fat thermogenesis[J].?JCI insight, 2021, 6(17).
更多動物用miRNA agomir應用案例持續更新中,敬請期待……

