外泌體研究策略+一站式技術工具 全面助力每一步創新發現

研究發現，外泌體參與調控重要的細胞生理活動，如免疫應答、凋亡、血管生成、炎癥反應等，其有望用于開發疾病治療的潛在靶點、早期診斷標記物、靶向藥物載體等，已成為近年來生命科學及醫學領域的重要研究熱點。

外泌體研究策略

注： miRNA、piRNA、lncRNA、mRNA等功能驗證方案及涉及產品請咨詢銳博生物技術人員

01. 外泌體抽提【自主專利+客戶文章1600+篇】

外泌體功能研究的關鍵前提是提取出高質量的外泌體，傳統提取方法利用超速離心或密度梯度離心對外泌體進行富集，這些方法耗時耗力，提取效果或產量卻并不理想。

銳博生物擁有自主專利的新型外泌體提取試劑盒，僅需通過簡單混勻和常規離心，即可從樣本中獲取大量結構完整的外泌體，為您提供更便捷、高效、高純度的提取方法。

【一種分離外泌體的方法及其試劑盒?? 專利申請號：CA201510469340.3】

產品特點：

■ 操作簡單，1小時快速抽提

■ 廣泛兼容多種樣品：培養上清、血清/血漿、尿液、腦脊液、唾液、乳汁、肺泡灌洗液等

■ 樣本少（血清2~4ml，培養上清20ml），提取量高

■ 富集效果精準可靠

HeLa 細胞上清經Ribo?Exosome Isolation Reagent 抽提，用攜帶熒光基團的CD63 和CD81 抗體分別與抽提前樣本及抽提產物進行免疫反應，使用流式細胞儀檢測熒光強度。結果表明，抽提前兩個標志物抗體熒光強度均處于背景閾值范圍內，抽提后熒光強度明顯提升，呈現陽性結果，表明exosomes 被富集出來。

代表性客戶文章：

[1] Sun L, Zhu W, Zhao P, et al. Long noncoding RNA UCA1 from hypoxia-conditioned hMSC-derived exosomes: a novel molecular target for cardioprotection through miR-873-5p/XIAP axis[J]. Cell death & disease, 2020, 11(8): 1-16.

[2] Zhang K, Dong C, Chen M, et al. Extracellular vesicle-mediated delivery of miR-101 inhibits lung metastasis in osteosarcoma[J]. Theranostics, 2020, 10(1): 411.

[3] Bai M, Li J, Yang H, et al. MiR-135b delivered by gastric tumor exosomes inhibits FOXO1 expression in endothelial cells and promotes angiogenesis[J]. Molecular Therapy, 2019.

[4] Xu W, Wu Y, Hu Z, et al. Exosomes from Microglia Attenuate Photoreceptor Injury and Neovascularization in an Animal Model of Retinopathy of Prematurity[J]. Molecular Therapy-Nucleic Acids, 2019, 16: 778-790.

[5] Nie X, Fan J, Li H, et al. miR-217 promotes cardiac hypertrophy and dysfunction by targeting PTEN[J]. Molecular Therapy-Nucleic Acids, 2018, 12: 254-266.

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02. 外泌體鑒定服務

a. 粒徑檢測

Zetasizer 儀器根據Stokes-Einstein 原理，使用動態光散射檢測由于顆粒布朗運動而產生散射光的波動隨時間的變化。檢測器將散射光信號轉化為電流信號，再通過數字相關器的運算處理，得到顆粒在溶液中擴散的速度信息，即擴散系數。

H460細胞上清經Ribo Exosomes Isolation Reagent抽提，Zetasizer Nano ZS 納米粒度儀檢測粒徑分布。

（注：實際檢測結果受不同樣本來源、樣本的純度等因素的影響，圖片僅供參考）

b. 表面標記物檢測

Exosomes 常見的特異性標記蛋白為CD63 和CD81，使用熒光的直標抗體結合流式細胞儀能夠統計出經分離的Exosomes 的陽性百分比，從而判斷Exosomes 的純度。

H460細胞上清經Ribo Exosomes Isolation Reagent抽提，流式鑒定Exosomes表面標志物CD63和CD81。

（注：實際檢測結果受不同樣本來源、樣本的純度等因素的影響，圖片僅供參考）

代表性客戶文章：

[1] Wang W, Li D B, Li R Y, et al. Diagnosis of hyperacute and acute ischaemic stroke: the potential utility of exosomal MicroRNA-21-5p and MicroRNA-30a-5p[J]. Cerebrovascular Diseases, 2018, 45(5-6): 204-212.

[2] Chen J, Yu Y, Li S, et al. Micro RNA‐30a ameliorates hepatic fibrosis by inhibiting Beclin1‐mediated autophagy[J]. Journal of cellular and molecular medicine, 2017, 21(12): 3679-3692.

委托科研服務：

03. 外泌體RNA測序服務【完成＞1500例外泌體RNA建庫，成功率＞95%】

a. 外泌體Small RNA測序

技術特色：

■ 3個數據庫深度挖掘及分析疾病相關miRNA biomarker；

■ 4個最新數據庫預測靶基因，結果更準確；

■ 可提供piRNA 差異分析（限定物種，人、大鼠、小鼠）；

■ 采用3 個外泌體或囊泡數據庫，注釋信息更完善，深入挖掘研究結果的佐證；

■ 提供腫瘤研究的臨床數據分析，使得分析結果更加飽滿。

b. 外泌體lncRNA測序

技術特色：

■ 采用3 個外泌體或囊泡數據庫，注釋信息更完善，深入挖掘研究結果的佐證；

■ 多種差異表達計算方法，可根據項目情況靈活選擇算法，展現更完美的數據；

■ 全新的比對軟件，分析速度更快，結果更準確；

■ 提供腫瘤研究的臨床數據分析，使得分析結果更加飽滿。

代表性客戶文章：

[1] Jiang F, Chen Q, Wang W, et al. Hepatocyte-Derived extracellular vesicles promote endothelial inflammation and atherogenesis via microRNA-1[J]. Journal of Hepatology, 2020, 72(1): 156-166.

[2] Shang A, Gu C, Wang W, et al. Exosomal circPACRGL promotes progression of colorectal cancer via the miR-142-3p/miR-506-3p-TGF-β1 axis[J]. Molecular cancer, 2020, 19(1): 1-15.

[3] Huang W, Yan Y, Liu Y, et al. Exosomes with low miR-34c-3p expression promote invasion and migration of non-small cell lung cancer by upregulating integrin α2β1[J]. Signal Transduction and Targeted Therapy, 2020, 5(1): 1-13.

[4] Fang S B, Zhang H Y, Wang C, et al. Small extracellular vesicles derived from human mesenchymal stromal cells prevent group 2 innate lymphoid cell-dominant allergic airway inflammation through delivery of miR-146a-5p[J]. Journal of extracellular vesicles, 2020, 9(1): 1723260.

[5] Hou Z, Qin X, Hu Y, et al. Longterm exercise-derived exosomal miR-342-5p: a novel exerkine for cardioprotection[J]. Circulation research, 2019, 124(9): 1386-1400.

委托科研服務：

4. qPCR驗證【自主專利產品】

a. miRNA qRT-PCR試劑盒

銳博生物提供擁有自主專利的莖環法和加尾法miRNA qPCR檢測試劑盒。【高靈敏度小RNA定量檢測方法及試劑盒，專利授權號：CA201410039162.6】

產品特點：

b. lncRNA qRT-PCR試劑盒

riboSCRIPT qRT-PCR Starter Kit 是銳博生物推出的基于SYBR Green I 嵌合熒光法的qRT-PCR 試劑盒，可實現lncRNA 或circRNA或mRNA 表達情況的快速、高效、準確的檢測。

產品特點：

■ 擴增效率高，特異性強

■ 靈敏度高，易于檢測

■ 使用方便，操作簡單

代表性客戶文章：

[1] Sun Y, Wang Q, Zhang Y, et al. Multigenerational maternal obesity increases the incidence of HCC in offspring via miR-27a-3p[J]. Journal of Hepatology, 2020, 73(3): 603-615.

[2] Zhao Y, Zhao M F, Jiang S, et al. Liver governs adipose remodelling via extracellular vesicles in response to lipid overload[J]. Nature communications, 2020, 11(1): 1-17.

[3] Ma H, Chang H, Yang W, et al. A novel IFNα-induced long noncoding RNA negatively regulates immunosuppression by interrupting H3K27 acetylation in head and neck squamous cell carcinoma[J]. Molecular cancer, 2020, 19(1): 1-16.

[4] Qiao J, Zhao J, Chang S, et al. MicroRNA-153 improves the neurogenesis of neural stem cells and enhances the cognitive ability of aged mice through the notch signaling pathway[J]. Cell Death & Differentiation, 2020, 27(2): 808-825.

[5] Wu P, Cai J, Chen Q, et al. Lnc-TALC promotes O 6-methylguanine-DNA methyltransferase expression via regulating the c-Met pathway by competitively binding with miR-20b-3p[J]. Nature communications, 2019, 10(1): 2045.

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